포도종실 에탄올 추출물에 함유된 (+)-카테킨, (-)-에피카테킨의모세관 전기영동법에 의한 분석
Capillary Electrophoretic Method for the Determination of (+)-Catechin, (-)-Epicatechin in Grape Seed Ethanol Extract
최원균(한경대학교); 정양섭(한경대학교); 정하열(한경대학교)
37권 4호, 513~518쪽
초록
포도종실추출물에 함유되어 강력한 항산화 작용을 나타내는 성분인 proanthocyanin의 구성 성분이면서 에피머인 (+)-catechin 과 (-)-epicatechin을 CE법을 이용하여 분석하였다. CE법을 이 용한 catechin류 분석의 최적 조건은 fused silica capillary(20 cm×50mm), current 56mA, voltage 10kV, phosphate/borate buffer(pH 6.0), 온도 20oC로서 (+)-catechin과 (-)-epicatechin을 6 분 이내에 매트릭스의 방해없이 분석할 수 있었다. 비색법, HPLC법과 CE분석법의 특징을 비교해 보면 비색법은 (+)-catechin과 (-)-epicatechin합한 총 함량은 알 수 있으나 두성분의 분리는 할 수 없었다. 또한 HPLC방법은 표준품은 두 성분이 잘 분리되었으나 시료 분석 시 proanthocyanin을 가수분해하기 위해 첨가한 산으로 인해 시료가 강산성을 띠어 컬럼 손상되 는 문제가 있어 직접 분석이 불가능하여 시료를 희석해야했으 며, 희석을 하여 분석할 경우에도 많은 잡 피크들로 정량적인 결과를 얻기에 용이하지 않았다. 한편 CE법의 경우 산 가수분 해한 시료를 별다른 처리 없이도 다른 성분의 방해 없이 분석 할 수 있었다. 분석소요시간의 경우 비색법은 실험단계가 복잡 하여 많은 시간이 걸렸으며 HPLC는 15분 그리고 CE는 6분 이내에 분석이 가능하였다. 재현성과 직선성을 보면 HPLC와 CE의 방법이 모두 양호하였고 검출한계에 있어서는 CE법이 0.035mg/L 로서 검출감도가 매우 우수하였다. 이와 같이 CE법 은 포도종실에 존재하는 (+)-catechin과 (-)-epicatechin을 분석하 는데 방법의 용이성, 분석결과의 정확성에 있어서 기존 방법인 비색법과 HPLC 방법보다 우수한 결과를 나타내었다.
Abstract
apillary electrophoresis (CE) method was developed to determine (+)-catechin and (-)-epicatechin contents in grape seed ethanol extract. CE separation was achieved using 100mM phosphate and borate buffer at pH 6.0 as background electrolyte and fused silica capillary with 50 microns i.d. x 375 microns O.D. (effective length 20.0 cm) maintained at 25oC. The applied voltage was 10 kV, and detection was performed by DAD at 210 nm. Two catechins were well separated within 6 min with repeatability of <0.8% RSD for migration time and <2.0% RSD for peak area, and correlation coefficients higher than 0.994 were obtained from 58.0 to 174.0 mg/L with detection limit of 0.035mg/L. Separated compounds were successfully determined. CE method was easy to handle and showed good reproducibility. CE method was compared with conventional coloring and HPLC methods, and main advantages of CE method were low amount of sample required, simple pre-sample treatment, good recovery rate, and short analysis time.
- 발행기관:
- 한국식품과학회
- 분류:
- 식품과학