아크리딘 오렌지 형광염색법을 이용한 저선량 감마선 유도 말초혈액 B와 T-림프구 미소핵 분석
Acridine Orange Stained Micronucleus Assay in Human B and T-lymphocytes after Low Dose γ-irradiation
최종미(방사선보건연구원); 임영기(한국수력원자력(주)방사선보건연구원); 김차순(한국수력원자력(주)방사선보건연구원); 김종순(인제대학교); 김희선(방사선보건연구원); 양광희(방사선보건연구원); 운재호(국립수의과학검역원)
29권 1호, 9~15쪽
초록
방사선에 의해 유도되는 사람 말초혈액 림프구 미소핵 관찰빈도를 높이면서 생물학적 선량평가법으로서 활용 가능성을 확인하고자 본 연구를 수행하였다. 우선 5명의 건강한 사람으로부터 혈액을 제공 받아 선량영역을 0에서 800cGy로 하여 감마선(137Cs)을 조사 한 후 김사와 아크리딘 오렌지 형광 염색하고 미소핵 출현빈도를 비교하였다. 아크리딘 오렌지 염색법을 이용하여 미소핵을 관찰하였을 때, 김사 염색법에 비교하여 적갈색의 비특이성 과립과 녹황색의 DNA가 붉은색의 세포질을 배경으로 명확히 구별되었을 뿐만 아니라 선량이 증가하면서 검출율도 높았다.아울러, 말초혈액 T와 B-림프구에 대하여 선량영역을 0에서 50cGy로 하여 방사선을 조사한 후 미소핵 출현빈도를 아크리딘 오렌지 염색하여 김사염색과 비교한 바, B-림프구에서 선량이 증가하면서 적어도 2배 이상 높게 관찰되었다. 본 실험 결과, 사람 말초 혈액 B-림프구를 대상으로 한 아크리딘 오렌지 형광염색 미소핵 분석법은 저선량 방사선 인체영향 평가나 과피폭 선량추정시 활용이 가능 할 것으로 생각된다.
Abstract
Firstly, we compared the two staining techniques, Giemsa and Acridine orange, to determine micronuclei on samples of cultures of five healthy human peripheral blood lymphocytes after -irradiation (137Cs) in dose ranges of 0 to 800cGy. It was found that the Acridine orange staining method gives more reliable results than the usual Giemsa staining method in micronucleus tests. Moreover, the frequency of micronuclei in cytokinesis-blocked human B-lymphocytes was studied after in vitro irradiation in dose ranges of 0 to 50cGy. After sorting and separating the B-lymphocytes, the frequency of radiation-induced micronuclei were observed as the end-point markers for the low-dose radiation dosimetry after staining with Giemsa and Acridine orange dyes. The micronuclei frequency in B-lymphocytes was significantly elevated from 10 to 30cGy -irradiation. The determination of micronuclei in B-lymphocytes after staining with Acridine orange was higher than that of Giemsa. The frequency of micronuclei in B-lymphocytes was observed to be at least two times higher than those of T-lymphocytes Giemsa in dose increasing. Therefore, the determination of low-dose radiation-induced micronuclei in B-lymphocytes after staining with Acridine orange is likely to have the greatest potential in the estimation of low dose radiation exposure.
- 발행기관:
- 대한방사선방어학회
- 분류:
- 원자력공학