인간 신세포암 세포에서 betulinic acid에 의한 세포 사멸, DNA 손상 및 G2/M기 세포주기 정지의 유도와 ROS 생성과의 연관성
Induction of Apoptosis by Betulinic Acid in Human Renal Cell Carcinoma Cells Is Associated with ROS-mediated G2/M Cell Cycle Arrest and DNA Damage
김성옥(경성대학교); 손변우(동의대학교); 이상협(동의대학교); 홍수현(동의대학교); 홍상훈(동의대학교); 최영현(동의대학교)
35권 2호, 134~143쪽
초록
다양한 식물에서 발견되는 lupine-type pentacyclic triterpene 계열 천연물인 betulinic acid는 항암 활성을 포함하여 광범위한 약리학적 잠재력을 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 인간 신세포암 세포의 증식에 대한 betulinic acid의 영향도 일부 보고된 있지만, 여전히 정확한 기전 연구는 구체적으로 이루어지지 못한 실정이다. 본 연구에서는 인간 신세포암 Caki-1 세포에서 betulinic acid의 항암 활성에 대한 추가적인 기전 연구를 수행하였다. 본 연구의 결과에 의하면 betulinic acid는 처리 농도 의존적으로 Caki-1 세포의 세포 생존율을 억제하였으며, 이는 caspase-3의 활성에 따른 세포 사멸 유도와 연관성이 있었다. 또한, betulinic acid에 노출된 세포에서는 DNA 가닥 절단 바이오 마커의 발현과 산화적 DNA 손상 지표의 생성이 증가하였다. 아울러 betulinic acid는 cyclin A 및 cyclin B1의 발현 감소와 p53 및 p21의 발현 증가를 통하여 Caki-1 세포의 증식을 세포주기 G2/M기에서 차단시켰으며, 증가된 p21은 Cdks와의 결합력을 증가시켰다. 나아가, betulinic acid는 Bax/ Bcl-2 발현의 비율을 증가시켜 미토콘드리아의 기능 손상에 기여하였으며, 이로 인하여 미토콘드리아에서 세포질로의 cytochrome c 유출이 증가하였다. Caki-1 세포에서 관찰된 이러한 betulinic acid의 다양한 항암 활성 관련 현상은 ROS의 생성과 연관이 있었으며, 특히 mtROS의 생성 증가가 이들 변화의 상위 조절자로 작용할 가능성을 높음을 알 수 있었다. 따라서 이 연구의 결과는 신세포암 세포를 포함한 암세포에서 betulinic acid의 항암 활성을 이해하는 기초 자료로서 활용성이 높을 것이다.
Abstract
Betulinic acid, a member of the lupin-like pentacyclic triterpene family found in a variety of plants, is known to have various physiological potentials, including anticancer activity. Although the effects of betulinic acid on the proliferation of human renal cell carcinoma (RCC) cells have been reported, the exact mechanism has not yet been specifically studied. In this study, we performed additional mechanistic studies on the anticancer activity of betulinic acid in RCC Caki-1 cells. Our results showed that betulinic acid significantly inhibited the cell viability of Caki-1 cells in a dose-dependent manner, which was closely related to the induction of apoptosis through the activation of caspase-3. In addition, the expression of the DNA strand break biomarker and the production of the oxidative DNA damage indicator were increased in cells exposed to betulinic acid. Betulinic acid also blocked the proliferation of Caki-1 cells in the G2/M phase of the cell cycle by decreasing the expression of cyclin A and cyclin B1 and increasing the expression of tumor suppressor p53 and cyclin-dependent kinase (Cdk) inhibitor p21WAF1/CIP1. Additionally, the increased p21 enhanced the binding affinity to Cdks. Furthermore, betulinic acid treatment contributed to mitochondrial dysfunction by increasing the ratio of Bax/Bcl-2 expression, which led to cytochrome c release from thr mitochondria to the cytosol. These anticancer activities of betulinic acid observed in Caki-1 cells were found to be associated with reactive oxygen species (ROS) production, and in particular, increased mitochondrial ROS production may act as an upstream regulator of the initiation of this anticancer activity.
- 발행기관:
- 한국생명과학회
- 분류:
- 기타자연과학